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食品中蛋白质的测定
作者:    出处:    浏览次数:4338(2011-10-9)
 

    适用于各类食品中蛋白质的测定。
  1 原理
  蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
  2 试剂
  所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
  2.1 硫酸铜。
  2.2 硫酸钾。
  2.3 硫酸。
  2.4 2%硼酸溶液。
  2.5 混合指示液:10.1%甲基红乙醇溶液与50.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用20.1%甲基红乙醇溶液与10.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
  2.6 40%氢氧化钠溶液。
  2.7 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。
  3 仪器
  定氮蒸馏装置。
  4 操作方法
  4.1 样品处理:精密称取0.22.0g固体样品或25g半固体样品或吸取1020ml液体样品(约相当氮3040mg),移入干燥的100ml500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,3g硫酸钾及20ml硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,再继续加热0.5h。取下放冷,小心加20ml水。放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
  4.2 按图装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,用调压器控制,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
  4.3 向接收瓶内加入10ml2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10.0ml样品消化稀释液由小玻杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使流入反应室内,塞紧小玻杯的棒状玻塞。将10ml40%氢氧化钠溶液倒入小玻杯,提起玻塞使其缓缓流入反应室,立即将玻塞盖紧,并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏5min。移动接受瓶,使冷凝管下端离开液面,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶,以0.05N硫酸或0.05N盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。
  同时吸取10.0ml试剂空白消化液按4.3操作。
  

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